JOURNAL OF LIGHT INDUSTRY

CN 41-1437/TS  ISSN 2096-1553

缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达

张飞 ,  魏涛 ,  刘寅 ,  何培新

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张飞, 魏涛, 刘寅, 等. 缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达[J]. 轻工学报, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
引用本文: 张飞, 魏涛, 刘寅, 等. 缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达[J]. 轻工学报, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
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ZHANG Fei, WEI Tao, LIU Yin and et al. Construction and expression of prokaryotic vector of valine-pyruvate transaminase gene[J]. Journal of Light Industry, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
Citation: ZHANG Fei, WEI Tao, LIU Yin and et al. Construction and expression of prokaryotic vector of valine-pyruvate transaminase gene[J]. Journal of Light Industry, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
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缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达

  • 郑州轻工业学院 食品与生物工程学院, 河南 郑州 450001

  • 基金项目: 郑州轻工业学院博士基金资助项目(2010BSJJ020)

  • 中图分类号: Q939.97

Construction and expression of prokaryotic vector of valine-pyruvate transaminase gene

  • College of Food and Bioengineering, Zhengzhou University of Light Industry, Zhengzhou 450001, China

  • Received Date: 2012-08-23
    Available Online: 2013-01-15

    CLC number: Q939.97

  • 摘要: 构建了具有缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌,对该酶表达条件进行了优化.PCR结果表明,扩增出一特异DNA条带且长度与avtA基因长度1254 bp符合.通过纸层析检测,筛选到了阳性克隆,但是酶活偏低.SDS-PAGE凝胶电泳显示目的蛋白表达量较低.酶表达优化结果显示:蛋白胨浓度12 g/L,IPTG浓度0.4 mmol/L,经过8 h诱导,酶活达到最大值.
    Abstract: The engineered strain of Escherichia coli with valine-pyruvate transaminase gene was constructed and the expression condition for valine-pyruvate transaminase was optimized.The result of PCR showed that a special DNA band was amplified and the length of the band was accord with the length of avtA,1 254 bp.Activity of valine-pyruvate transaminase was found by paper chromatography but the enzyme activity was not high.The expression of valine-pyruvate transaminase was evaluated by SDS-PAGE and a high expression was displayed.The optimal conditions were peptone 12 g/L,IPTG 0.4 mmol/L and induced time 8 h.
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  • 收稿日期:  2012-08-23
  • 刊出日期:  2013-01-15
通讯作者: 陈斌, bchen63@163.com
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    沈阳化工大学材料科学与工程学院 沈阳 110142

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引用本文: 张飞, 魏涛, 刘寅, 等. 缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达[J]. 轻工学报, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
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ZHANG Fei, WEI Tao, LIU Yin and et al. Construction and expression of prokaryotic vector of valine-pyruvate transaminase gene[J]. Journal of Light Industry, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
Citation: ZHANG Fei, WEI Tao, LIU Yin and et al. Construction and expression of prokaryotic vector of valine-pyruvate transaminase gene[J]. Journal of Light Industry, 2013, 28(1): 7-10. doi: 10.3969/j.issn.2095-476X.2013.01.002
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缬氨酸转氨酶基因原核表达载体构建及表达

  • 郑州轻工业学院 食品与生物工程学院, 河南 郑州 450001
  • 收稿日期: 2012-08-23
  • 网络出版日期: 2013-01-15
基金项目:  郑州轻工业学院博士基金资助项目(2010BSJJ020)

摘要: 构建了具有缬氨酸转氨酶基因的大肠杆菌工程菌,对该酶表达条件进行了优化.PCR结果表明,扩增出一特异DNA条带且长度与avtA基因长度1254 bp符合.通过纸层析检测,筛选到了阳性克隆,但是酶活偏低.SDS-PAGE凝胶电泳显示目的蛋白表达量较低.酶表达优化结果显示:蛋白胨浓度12 g/L,IPTG浓度0.4 mmol/L,经过8 h诱导,酶活达到最大值.

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