【目的】 开发降解烟草糖苷类化合物并生成香味成分的生物酶。【方法】 以3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷为唯一碳源筛选降解烟草糖苷的菌株,对该菌株进行基因组分析,分离纯化降解菌糖苷酶,考查糖苷酶的酶学特性,鉴定并挖掘烟草糖苷酶。【结果】 菌株HZW-15可降解3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷,其粗酶处理烟草粗糖苷后,3-氧代-α-紫罗兰醇、苯甲醇、苯乙醇等香味成分显著增加;酶液处理再造烟叶浓缩液后甜感突出、余味干净、香气质改善;当酶解温度40 ℃,转速150 r/min,pH值7,钾离子浓度10 mmol/L时,3-氧代-α-紫罗兰醇含量增加了2.3倍;HZW-15基因组共有5 554 921个碱基,编码76个糖苷水解酶基因。【结论】 利用质谱鉴定纯化后的酶组分,推测6-磷酸-β-葡萄糖苷酶、β-葡萄糖糖苷酶和1,4-α-葡聚糖分支酶为功能酶,可为烟用糖苷酶的开发提供参考。